ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前常規(guī)樣本的收集及處理方法

　　ELISA試劑盒檢測的目的是為實(shí)驗(yàn)提供可靠定量分析實(shí)驗(yàn)的依據(jù)。它的每一步都需要大家謹(jǐn)慎小心，在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本及時儲存在4℃冷藏箱中備用。對于隔天再檢測的樣本及時分裝后凍存在-20℃冷藏箱中備用，有條件的*是在-70℃凍存?zhèn)溆谩?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。同時為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，在實(shí)驗(yàn)過程中必須堅持全面質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制。

　　我們實(shí)驗(yàn)中的常規(guī)標(biāo)本：包括血清、血漿、尿液、組織、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

　　1．血清樣本

　　分離管分離血清。在1000g離心之前，使血樣凝集30分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測，或者分裝，-20℃貯存。避免反復(fù)凍融。

　　2.血漿樣本

　　EDTA、枸櫞酸鈉或肝素抗凝收集血漿樣本。在血樣收集30分鐘內(nèi)離心收集樣本。即刻檢測，或者分裝，-20℃貯存。避免反復(fù)凍融。

　　注意：不要使用嚴(yán)重溶血或高血脂的樣本。所有樣本收集后，應(yīng)及時分裝并貯存于-20℃。如果在24小時內(nèi)檢測，樣本可以存放在2-8℃。避免樣本的反復(fù)凍融。在分析前，冷凍樣本應(yīng)該緩慢的恢復(fù)至室溫，輕柔地混勻。檢測前，樣本中可見的沉淀必須去除。

　　3.尿液樣本

　　用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

　　4.組織標(biāo)本

　　切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

　　5.細(xì)胞培養(yǎng)上清

　　細(xì)胞培養(yǎng)液在2500rpm/min離心20分鐘后，收集上清即刻檢測，或者分裝，-20℃貯存。避免反復(fù)凍融。