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      elisa試劑盒為生物科研起到了積極的推動作用

      更新時(shí)間:2019-11-26點(diǎn)擊次數(shù):1465
        elisa具有敏感性高、特異性強(qiáng)、操作簡單等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體的測定,為輔助臨床診斷與生物科研起到了積極的推動作用。但elisa測定中影響因素較多,操作過程中每個環(huán)節(jié)都會對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響,出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
        試劑的選擇:試劑的選擇是保證血液檢測質(zhì)量的關(guān)鍵要素。雖然國家采用批批檢定的形式對elisa試劑嚴(yán)格把關(guān),但不同的試劑在使用效果上仍存在在差異。要選購度相對高、具有“三證”的試劑,不要用無批號的試劑,選用與儀器配套的試劑。更不要使用過期的試劑和混用不同批號的試劑。
        試劑的準(zhǔn)備:在臨床實(shí)驗(yàn)室,對試劑的準(zhǔn)備一般不太注意,通常的做法是在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面時(shí)間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標(biāo)本的檢測出現(xiàn)假陰性。因此,在elisa測定中試劑的準(zhǔn)備為關(guān)鍵的是,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30min后,再進(jìn)行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求。
        抗原與抗體、抗體與酶標(biāo)抗體反應(yīng)一般在37℃2h~3h達(dá)到高峰。時(shí)間太短,敏感性下降,時(shí)間太長,吸附的抗原或復(fù)合物(在這個溫度下)可能脫落。酶底物反應(yīng)時(shí)間的確定:一般采用15min~30min~45min。也可以標(biāo)準(zhǔn)陽性血清為準(zhǔn),隨時(shí)測定其OD值,當(dāng)達(dá)到規(guī)定的OD值時(shí),即終止反應(yīng)。

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