關(guān)于ELISA試劑盒常用實驗原理方法介紹

2020-09-27 ELISA，即酶聯(lián)免疫吸附實驗，其基本原理是將一定濃度的抗原或者抗體通過物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待檢標本，通過酶標物顯色的深淺間接反映被檢抗原或者抗體的存在與否或者量的多少。ELISA技術(shù)作為免疫標記技術(shù)（包含免疫熒光技術(shù)，免疫放射技術(shù)，免疫酶技術(shù)和免疫膠體金技術(shù)）中的一種，已廣泛應(yīng)用于科研和臨床實驗中，具有快速，定性或者定量甚至定位的特點。1.競爭法競爭法一般分為直接競爭法和間接競爭法，這里我們以直接競爭法為例進行原理講解。直接競爭法，其基本原理是：將合...

ELISA試劑盒對溫度環(huán)境有哪些要求？

2020-08-18 ELISA屬固相，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例，參加板孔中的標本，其間的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的時機，只有靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的進程，因而需經(jīng)分散才干到達反響的終點。在其后參加的酶標記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反響總是需求必定時刻的溫育。ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結(jié)合物，加底物。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并...

導致ELISA試劑盒變質(zhì)的原因有哪些

2020-08-11 ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實驗中比較常見的問題，那么，ELISA試劑盒變質(zhì)是因為什么呢？是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保？一旦變質(zhì)會有什么影響呢？一、方法學的影響ELISA測定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時差所引起的不gong平競爭等因素的影響，結(jié)果重復性較差，質(zhì)量較難控制。二、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項...

ELISA試劑盒實驗前常規(guī)樣本的收集及處理方法

2020-05-27 ELISA試劑盒檢測的目的是為實驗提供可靠定量分析實驗的依據(jù)。它的每一步都需要大家謹慎小心，在收集樣本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。收集后當天就進行檢測的樣本及時儲存在4℃冷藏箱中備用。對于隔天再檢測的樣本及時分裝后凍存在-20℃冷藏箱中備用，有條件的*是在-70℃凍存?zhèn)溆谩吮緫?yīng)避免反復凍融。同時為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制。我們實驗中的常規(guī)標本：包括血清、血漿、尿液、組織、細胞培養(yǎng)上清等。1．血清...

ELISA試劑盒的包被問題是什么？

2020-05-20 在使用ELISA試劑盒進行實驗的時候，需要注意很多問題，比如溫育、顯色、包被等問題。其中，包被是要特別注意的一個問題，直接關(guān)系到實驗的效果。今天小編就領(lǐng)著大家一起來看看這其中的奧妙吧！包被的方式將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團，故更易吸...

人（Human）HA tag標簽（HA tag） ELISA檢測試劑盒

2020-05-19 本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷人（Human）HAtag標簽（HAtag）ELISA檢測試劑盒使用說明書檢測原理試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被HAtag標簽（HAtag）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的HAtag標簽（HAtag）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（...

ELISA實驗過程中常見問題與解決方法

2020-04-23 ELISA試劑盒以其特重復性好、異性強、敏感性高等優(yōu)點，在科研中深受各大科研工作者的喜愛。ELISA方法實驗常會出現(xiàn)一些結(jié)果不好的現(xiàn)象，小編總結(jié)了常見的幾大類問題和對應(yīng)的解決方案，具體如下：ELISA實驗結(jié)果顯色淡、靈敏度偏低可能原因與具體解決辦法如下：1、試劑盒在運輸途中時間太長，溫度太高解決辦法：盡量縮短運輸時間，夏季應(yīng)放冰塊降溫2、試劑盒未充分平衡解決辦法：試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。3、培養(yǎng)箱溫度不...

雪卡毒素檢測試劑盒實驗原理

2020-04-09 雪卡毒素酶聯(lián)免疫分析（ELISA）本試劑盒僅供研究使用。1使用目的：本試劑盒用于魚、蝦和肉類組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣等樣本中雪卡毒素的定量檢測。2實驗原理本試劑盒采用競爭ELISA方法，在微孔板包被有雪卡毒素偶聯(lián)抗原，加入雪卡毒素標準品或樣品，游離雪卡毒素與微孔條上預包被的雪卡毒素偶聯(lián)抗原互相競爭抗雪卡毒素抗體酶標記物，用TMB底物顯色，加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色，用酶標儀在450nm波長下進行檢測，吸光值與樣品中雪卡毒素含量成反比，通過標準...